补饲不同剂量竹叶提取物对泌乳期伊犁马血液生化指标的影响

时间:2023-10-01 09:30:05 来源:网友投稿

吴睿宸,姚新奎,2,3,孟 军,2,3,曾亚琦,2,3,王川坤,2,阿拉法特·艾合买提,努尔塔依·库尔班塔依

(1.**农业大学动物科学学院,乌鲁木齐 830052;
2.**农业大学马产业研究院,乌鲁木齐 830052;
3.**马繁育与运动生理重点实验室,乌鲁木齐 830052)

【研究意义】竹叶提取物中含有大量的黄酮类化合物,具有很好的抗氧化能力和还原能力,同时具有明显的抑菌作用以及对体内激素的调节,研究泌乳期伊犁马补喂不同梯度竹叶提取物后,伊犁马血液生化指标的差异变化,对了解竹叶提取物对泌乳期伊犁马的作用效果。【前人研究进展】竹提取物经口、皮肤及眼刺激毒理学试验得出其毒副作用微小[1],且具有很好的抗氧化能力和还原能力[2],能够减轻机体炎症[3]以及调节体内激素[4, 5]的变化;
沈明明[6]的研究证明,竹叶提取物可提高肉鸡机体抗氧化能力并从一定程度上能够达到改善肉鸡健康作用。汪新亮[7],刘连亮等[8, 9]通过建立不同的病理性大鼠模型,研究竹叶提取物作用于体内相关抗氧化因子所产生的影响,验证竹叶提取物的抗氧化作用。侯昆等[10]研究发现,竹叶提取物中的竹叶黄酮能够降低奶牛血清中白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。肖熠等[11]发现在饲粮中短期添加竹叶黄酮能够对保育猪的生长存在一定促进作用,同时具有微弱的免疫激活作用,有助于保育猪在断奶过程中的适应性。潘静等[12]研究苦竹叶提取物对Ⅱ型糖尿病小鼠的降糖机理时发现对其相关激素也有一定的调节作用。【本研究切入点】竹叶提取物以添加剂的形式应用于动物饲养中具有很大的发展潜力,目前将竹叶提取物作为伊犁马的营养添加剂的研究还未见报道。需研究不同补饲梯度对泌乳期伊犁马血液中抗氧化、免疫以及激素指标的影响。【拟解决的关键问题】分析对其泌乳期伊犁马血液生化指标的影响,为竹叶提取物对泌乳期伊犁马抗氧化、免疫性能以及血清蛋白、激素调节的研究提供了前期的理论基础和数据支撑。

1.1 材 料

1.1.1 竹叶提取物

竹叶提取物选自陕西森元生物科技有限公司,是以淡竹叶为原料的棕黄色粉末,纯度为60%。

1.1.2 马匹

随机选取年龄、胎次、体尺相近的健康泌乳期伊犁马24匹为研究对象。所选马匹由**伊犁哈萨克自治州昭苏马场提供。

1.2 方 法

1.2.1 试验设计

试验自 2020 年 7 月开始,开始前进行为期1周的预试验。将所选母马随机分为4组,每组各6匹,分别为对照组、试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,各组依次添加补饲的竹叶提取物为0、10、20、30 g/d。预试验结束后开始正式试验,在试验第0、15、30、45、60 d的时候进行数据采集,每匹马采集10 mL血样,在室温下静置1 h后于 3 000 r/min离心15 min获取血清,血清于-20℃保存备用。

1.2.2 饲养管理

母马全天自由采食牧草,自由饮水。每天早上08:00,将母马赶入单体栏,按照梯度分组补喂竹叶提取物分别与1.00 kg精料混合,在料兜中加少量水搅拌均匀,保证时间充分,舔食干净。

1.2.3 指标测定

运用比色法测定丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、羟自由基(-OH)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、白蛋白球蛋白比(A/G)。运用酶联免疫法测定免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、甲状腺素(T4)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、催乳素(PRL)。

1.3 数据处理

数据经Excel 2010 整理,采用SPSS 19.0一般线性模型多变量方差分析,固定效应有试验处理(Trt)、采样时间(Date)及二者之间的交互作用(Trt×Date),以试验处理(Trt)为主效应进行分析讨论,结果以平均数(mean)和标准误(SE)表示,差异显著则用LSD法进行多重比较。

2.1 补饲不同梯度对其血液中抗氧化因子影响

研究表明,MDA的浓度变化与对照组相比,试验Ⅰ组提高1.44%,试验Ⅱ组降低7.60%,但差异均不显著(P>0.05),试验Ⅲ组降低了19.32%,差异极显著(P<0.01),且试验Ⅲ组与Ⅰ组组间MDA浓度差异达到极显著水平(P<0.01);
-OH的浓度变化与对照组相比,试验Ⅰ组提高4.27%,试验Ⅱ、Ⅲ组分别降低9.86%、8.12%,但均无显著差异(P>0.05);
SOD浓度变化与对照组相比,试验Ⅰ组提高3.24%、试验Ⅱ、Ⅲ组分别降低2.33%、7.67%,但均无显著差异(P>0.05)。表1

2.2 补饲不同梯度对其血清蛋白的影响变化

研究表明,TP浓度变化与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别降低了2.68%、7.34%、2.65%,试验Ⅰ、Ⅲ组均无显著差异(P>0.05),试验Ⅱ组差异极显著(P<0.01);
ALB浓度变化与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ组分别降低了6.41%、3.02%,试验Ⅲ组升高2.79%,试验Ⅰ组ALB浓度与对照组差异显著(P<0.05);
GLB浓度变化与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别降低了1.15%、9.11%、4.88%,试验Ⅰ、Ⅲ组与对照组均无显著差异(P>0.05),试验Ⅱ组GLB浓度与对照组差异极显著(P<0.01);
A/G变化与对照组相比,试验Ⅰ组降低了5.56%,试验Ⅱ、Ⅲ组分别升高6.52%、7.49%,与对照组均无显著差异(P>0.05),试验Ⅰ组与Ⅱ、Ⅲ组组间A/G差异极显著(P<0.01)。表2

表1 补喂不同梯度竹叶提取物下泌乳期伊犁马血液中抗氧化因子变化

表2 补喂不同梯度竹叶提取物下泌乳期伊犁马血液中蛋白变化

2.3 补饲不同梯度对其血液免疫因子的变化

研究表明,IL-1β的浓度变化与对照相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别升高了5.10%、32.04%、13.45%;
TNF-α浓度变化与对照相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别升高了3.47%、26.75%、10.37%;
试验Ⅱ组IL-1β、TNF-α浓度与对照组差异极显著(P<0.01),且试验Ⅰ组与Ⅱ组组间IL-1β、TNF-α浓度差异显著(P<0.05);
IgG浓度与对照组相比,试验Ⅰ组升高1.53%,试验Ⅱ、Ⅲ组分别降低2.74%、3.09%;
IgM浓度与对照组相比,试验Ⅰ组升高2.05%,试验Ⅱ、Ⅲ组分别降低2.77%、5.21%,IgG与IgM的浓度变化差异均不显著(P>0.05)。表3

表3 饲喂不同梯度竹叶提取物下泌乳期伊犁马血液中免疫因子变化

2.4 补喂不同梯度竹叶提取物对其血液中激素的影响

研究表明,PRL浓度与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别升高了6.52%、35.94%、15.46%,试验Ⅱ组PRL浓度与对照组差异极显著(P<0.01),且试验Ⅰ组与Ⅱ组组间PRL浓度差异显著(P<0.05);
T4浓度与对照组相比,试验Ⅰ组降低1.47%,试验Ⅱ、Ⅲ组分别升高0.81%、1.17%;
P浓度与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ组分别降低20.59%、7.99%,试验Ⅲ组升高1.40%;
E2浓度与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别升高了54.67%、72.44%、30.31%,T4、P、E2的浓度变化与对照组均无显著差异(P>0.05)。表4

表4 补喂不同梯度竹叶提取物下泌乳期伊犁马血液中激素变化

3.1 补喂不同梯度竹叶提取物对其抗氧化性能的影响

MDA作为脂质过氧化[13]的终产物,其含量变化反映出机体抗氧化能力[14, 15]。研究表明,随饲喂梯度的升高会影响MDA含量的变化,且试验Ⅲ组MDA浓度极显著低于对照组。与前人研究发现黄酮类化合物可以降低MDA的含量来提高机体抗氧化能力[16, 17]的结果一致。SOD,-OH在血液中含量虽没有显著变化,但随着饲喂梯度升高,其含量有逐渐降低的趋势,该趋势与MDA的浓度变化相似。尽管植物提取物中的黄酮类化合物在生物系统中起到的保护作用均与其抗氧化能力有关[18],但竹叶提取物的抗氧化作用主要体现在对MDA含量的影响。

3.2 补喂不同梯度竹叶提取物对其血清蛋白的影响

外来刺激能够作用于MAPK信号传导通路,调控细胞的增殖分化,免疫细胞的增多会加速白蛋白与球蛋白的产生,进行免疫调节。研究发现,血液中TP、GLB的浓度只在试验Ⅱ组梯度下显著降低。与前人[19, 20]的研究的结果有差异。可能是试验期内,马匹饲养环境主要以放牧为主所致。而通过试验Ⅰ、Ⅲ组与试验Ⅱ组对比发现,补饲适量的竹叶提取物能够影响血清蛋白的含量。

3.3 补喂不同梯度竹叶提取物对其血液免疫因子的影响

TNF-α和IL-1β是巨噬细胞产生的主要促炎因子,与各种慢性炎症疾病均有关[21]。炎症部位的白细胞介素-1(IL-1)含量上升会促进和维持炎症反应[22]。研究发现,在试验设计梯度内,试验Ⅱ组补喂梯度会造成血液中IL-1β、TNF-α的浓度极显著升高。通过增加释放促炎因子会导致动物机体慢性疲劳[23, 24]。与前人的研究不一致。许多研究表明,补充黄酮类化合物会一定程度的降低IL-1β、TNF-α浓度,抑制炎性反应,实现抗疲劳效果[25],提高免疫力。

3.4 补饲不同梯度对泌乳期伊犁马血液激素的影响

适量甲状腺激素[26]为维持正常心血管功能所必需。孕酮含量的变化与动物体的生殖受损有关[27],雌二醇与发情的表达和较早的排卵有关[28]。研究发现,饲喂不同梯度竹叶提取物对T4、P、E2的含量变化并不明显,但对PRL产生较大影响,在饲喂梯度升高,血液中PRL的含量明显升高。与前人研究[29]竹叶提取物对其它动物体内PRL的作用结果一致。PRL的含量的升高进一步促进了泌乳期伊犁马的乳腺发育和乳汁的生成,减少泌乳量不足的风险,提高其产奶性能。

补饲20、30 g/d竹叶提取物均能对泌乳期伊犁马的血液生化指标产生影响;
当补饲20 g/d竹叶提取物时,血液中GLB的浓度呈极显著下降,血液中免疫指标IL-1β、TNF-α和激素指标PRL的浓度均呈极显著升高,血液中PRL浓度调节其体内生殖激素的变化,PRL浓度的升高能促进乳腺发育和乳汁的分泌,提高其泌乳期伊犁马的产奶性能,但补饲该梯度条件下竹叶提取物会使泌乳期母马血液蛋白含量下降和炎性细胞的增加,导致机体更易疲劳;
当补饲30 g/d竹叶提取物时,血液中抗氧化指标MDA的浓度呈极显著下降,血液中氧化终产物MDA浓度的降低,可有效提高泌乳期伊犁马的抗氧化能力。

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